光合细菌的培养方法 务农网- 6M#+*V_d*@XuMAst
光合细菌大量培养时所用的培养容器大多为10000～20000毫升的细口瓶、塑料薄膜袋或塑料水槽。这些培养容器既不宜用高压蒸汽灭菌，也不宜用高温烘箱灭菌，在生产上只能用化学物品进行消毒处理，如利用高锰酸钾溶液浸泡或次氯酸钠浸洗。 www.wunong.net务农网- 0&@C&HxD%gL{DVb (2)培养基的配制 www.wunong.net务农网- QrKOjbYN5j^(Bxp| 培养基的配方：培养光合细菌首先应选择一个能基本满足培养菌种的生理生态特性和营养需求、经过培养实践证明效果比较理想的配方。 www.wunong.net务农网- o5+4_aphtyFKh8z6
配制培养基的用水：配制培养基的用水，根据淡水种和海水种的不同而有一定的差异。如果培养的光合细菌是淡水种，菌种培养可用自来水或井水配制；如果培养的光合细菌是海水种，则用天然海水或人工海水配制，用天然海水配制培养基，可免加钙盐如六水氯化钙(CaCl。．6H2O)或二水氯化钙(CaCI2.2H20)和镁盐如七水硫酸镁(MgS04.7H2O)；另外在海水中加入磷元素时不能用磷酸氢二钾(K2HP04)，应该用磷酸二氢钾(KH2P04)，不然会产生大量沉淀。 www.wunong.net- |}l*&AnJ8#hUu97:
配制：配制培养基的基本步骤是按培养基配方把各种成分逐一称量、溶解、混合，配成培养基，也可以把部分组分配成母液，使用比较方便。目前进行光合细菌大量培养的培养基的来源主要有两种。一种是用各种营养成分的化学试剂人工配制的培养基。这种培养基的配制方法与培养菌种的培养基相同。另一种是用含大量有机物的各种废水，适当补加某些营养成分，作为培养基。用含大量有机物的废水作培养基，应先把废水的pH值调节到7左右，大量通气，使好气性异养细菌大量繁殖，将废水中的大量有机物分子分解成低分子有机物，然后煮沸消毒，再补加某些营养成分。 www.wunong.net务农网- nqJl^5~V pa )vs3 灭菌和消毒：菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸汽灭菌锅消毒灭菌。小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅煮沸消毒；大型生产性培养则先把培养用水经次氯酸钠处理后，再加入配方成分，充分溶解后即可。 www.wunong.net- V1 e8aq!u+^:N*W%
(3)接种 www.wunong.net- zHNcR3+~"$lW*_eG 培养基配制消毒后，应立即进行接种，菌种的质量要好，应处于指数生长期。接种前应仔细镜检，菌种不能有污染，光合细菌大量培养时接种量要大，一般应达到1：2，最好能达到1：1，尤其是微气培养接种量应高些，即1份菌种接种于2份培养基中。接种量大，光合细菌一开始就占有绝对优势，可以抑制杂菌的生长；同时参与繁殖的细胞数量多，增殖速度快，有利于提高产量和质量。 (4)日常管理 为了达到培养的高产目的，必须为培养的光合细菌提供最适宜的生态环境，同时，光合细菌在增殖过程中，生态环境又是不断变化的，主要的变化是菌液的透光性变差和pH值升高，因此要调整到适宜或最适状态，这些都是通过日常管理来完成，日常管理的主要内容包括以下几个方面。 搅拌：搅拌的作用有两个，一个是使光合细菌在培养基中分布均匀，另一个作用是使光合细菌经常变换位置，尤其是帮助沉淀的光合细菌上浮，接受光照，从而使每个细菌受光相对均匀，保持细菌良好的生长状态。因此搅拌是光合细菌培养中不可忽视的一项管理措施。 调节温度：光合细菌对温度的适应范围很广，一般在20～39℃，均能正常生长繁殖。所以光合细菌的大量培养不一定要求恒温，如果一天中的温度变化在适温范围内，可以在常温下进行培育。但在日常管理中也要注意温度问题，并作适当的调节。如果温度偏低，可以把培养容器放在箱子里，利用白炽灯散发的热来提高箱内温度，并根据需要，调整箱子的密封程度来达到调节温度的目的；如果温度过高，可开窗通风或用电风扇降温。对于经常培养的淡水用菌种沼泽红假单孢菌，最适温度为28～32℃。 调节pH值：随着光合细菌的增殖，菌液的pH值不断上升，这是光合细菌大量增殖的结果，也是光合细菌生长繁殖正常的标志，但是pH值上升到一定高度超越最适范围甚至超越生长的适宜范围时，说明生长已到顶峰，光合细菌随即增殖缓慢或不再增殖。因此菌液的pH值升高是限制光合细菌增殖的一个主要因素，调节的方法是通过加酸的办法来降低菌液的酸碱度，常用酸主要是醋酸、乳酸和盐酸均可，最常用的是醋酸，也可通过采收或再接种扩大培养的措施调节pH值。 调节光照强度：培养光合细菌需要连续进行照明，白天应尽量利用自然光，以节约能源，晚间则需人工光源照明或完全用人工光源培养。人工光源可以用白炽灯泡，对于大量培养时，用碘钨灯更经济，白天自然光照不足时也要用人工光源进行及时补充。 在光合细菌大量培养时，由于培养容器大，光通过菌液衰减比较严重，菌液表层和深层的光照强度相差可能较大，故应适当增加光照强度，可以增加到2000～5000Lx;如果厌氧条件控制的好，光合细菌生长繁殖的快，密度高，光照强度还可以提高到5000～10000Lx，增加光照度后，要适当增加搅拌次数。调节光照强度可以通过调节培养容器与光源的距离或使用可控电源箱来调节。 (5)收获 光合细菌的生长曲线呈“S”型，即增殖最快的是指数生长期，同时在指数生长期其质量也是最好，指数生长期之后，虽然数量还在缓慢生长，但质量已明显下降，因此收获时最好选择在指数生长期之末。 (责任编辑：admin) |